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液相色譜技術(shù)的發(fā)展歷程

2011-07-29

                                              液相色譜技術(shù)的發(fā)展歷程

編輯：123儀器商城　

　
　　色譜的發(fā)明者，俄國(guó)植物學(xué)家M.S.Tswett，是在研究植物色素的過程中，于1906年創(chuàng)立這種簡(jiǎn)易的分離技術(shù)，奠定了傳統(tǒng)色譜法基礎(chǔ)。從此之后，化學(xué)家、生物化學(xué)家和生理學(xué)家們?cè)谥苽涓呒兓衔?、分離和鑒定復(fù)雜混合物時(shí)便有了一條嶄新的有效途徑。自從有了這種手段，使許多過去被認(rèn)為是單一的物質(zhì)，判明卻是多種化合物的混合物；許多化學(xué)反應(yīng)的過程依靠這種方法而得以探討；終于使許多復(fù)雜混合物，例如維生素、藥物、色素、氨基酸等得到離析；這種方法甚至幫助科學(xué)家們了解了一些長(zhǎng)期模糊不清的自然現(xiàn)象，諸如植物與動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)、激素對(duì)人和動(dòng)物的生理特性、維生素在動(dòng)植物體中的分布等等問題。Tswett的實(shí)驗(yàn)意義很大，盡管他于1907年在德國(guó)柏林植物學(xué)會(huì)議上反復(fù)強(qiáng)調(diào)色譜技術(shù)，但并沒有受到當(dāng)時(shí)科學(xué)界的重視。經(jīng)過二十五年后，德籍奧地利化學(xué)家R.Kuhn等利用他的方法在纖維狀氧化鋁和碳酸鈣的吸附柱上將過去一個(gè)世紀(jì)以來公認(rèn)為單一的結(jié)晶狀胡蘿卜素分離成a和b兩個(gè)同分異構(gòu)體，并由所取得的純胡蘿卜素確定出了其分子式。另外他還發(fā)現(xiàn)了八種新的類胡蘿卜素，并把它們制成純品，進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析。同年，他又把注意力集中在維生素的研究上。在確定了維生素A的結(jié)構(gòu)以后，于1933年從35000升脫脂牛奶中分離出一克核黃素(即維生素B2)，制得結(jié)晶，并測(cè)定了它的結(jié)構(gòu)。此外，他還用色譜法從蛋黃中分離出了葉黃素；還曾把腌魚腐敗細(xì)菌中所含的紅色類胡蘿卜素確定離析出來并制成結(jié)晶。Kuhn正是由于在維生素和胡蘿卜素的離析與結(jié)構(gòu)分析中取得了重大研究成果而獲得了1938年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)，也正因?yàn)樗某錾ぷ魇股V法名聲大振，迅速為各國(guó)科學(xué)家們所注目，廣泛被采用起來。
　　
　　1液相色譜固定相、
　　
　　1.1正相色譜八十年代初，人們使用的正相色譜固定相硅膠和吡啶硫氰酸鎳鹽的絡(luò)合物晶體能與芳香族化合物形成包合物用于分離芳香族含氮異構(gòu)體和膽甾醇晶體。已有人[1]將焦炭吸附劑作為填料和鍵合硅膠作過比較并研究其熱力學(xué)機(jī)理。具有離子化或非離子化功能團(tuán)的大孔聚合物也開始應(yīng)用于液相色譜，這些聚合物在整個(gè)酸堿范圍內(nèi)穩(wěn)定，其中一個(gè)缺點(diǎn)是當(dāng)溶劑改變時(shí)，它們會(huì)熱脹冷縮，但是其主要的分析方面用途，即從水中收集痕量研究化合物是沒有問題的，通過適當(dāng)?shù)奶幚硌b入色譜柱，一些物質(zhì)出現(xiàn)過度的峰帶變寬，而另一些則出現(xiàn)尖、窄的峰帶和高分離度，在強(qiáng)堿性大孔樹脂中120分鐘內(nèi)可分離100種尿液中紫外吸收物質(zhì)[2]。有人將各種鏈長(zhǎng)度的碳?xì)渑湮惑w鍵合到硅膠上，根據(jù)鏈長(zhǎng)短效應(yīng)研究保留值的影響，也有過類似的報(bào)道，將C22鍵合相以及制備鍵合相擔(dān)體各種條件作過比較，其鍵長(zhǎng)度和吸附自由能成線性關(guān)系。一般地，堿溶液會(huì)破壞硅膠，烷基胺比季銨鹽更會(huì)腐蝕硅膠填料，故通過加填有5mm硅膠的短預(yù)柱來洗脫堿性溶液。Kataev等[3]用聚三氟苯乙烯涂成的硅膠微?；|(zhì)并應(yīng)用到鹵代芳烴、多肽和蛋白質(zhì)的分離。1993年11月，Majors討論了在日本發(fā)展迅速的HPLC聚合物填料。Hosoya制備了大孔聚合乙烯—對(duì)—叔丁基苯甲酸丁酯微球和兩種別的聚合物微球的性能以及更多的C18HPLC固定相。
　　
　　1.2反相色譜固定相的研究進(jìn)入九十年代更是熱火朝天。這方面的研究報(bào)道遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過流動(dòng)相的研究，人們不斷探索保留過程及相關(guān)烷基鍵結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性和可能制得的各種新型固定相。Bolok和其合作者從統(tǒng)計(jì)技術(shù)研究反相色譜柱的老化過程。Montes等評(píng)價(jià)了一種硅氫化物介質(zhì)的硅氫烯制備烷基鍵合相，更早時(shí)候基質(zhì)制備可供參考。Moriyama等評(píng)價(jià)了用2mm硅膠制得的TSK膠SuperODS新型反相色譜柱的特性，他們論述了如何分離手性化合物。Schmid與合作者論述了含飽和脂肪酸鍵合相的合成與性質(zhì)，并且與相應(yīng)的飽和烴固定相的使用作過比較。Pesek和Matyska合成了兩種不同的二醇鍵合相，包括一種是“可靠的”，另一種通過將7－辛烯－1，2－二醇直接連接到氫化硅基質(zhì)上。Jino和Nakamura[4]評(píng)價(jià)了用氟處理的鍵合硅膠作為一種反相色譜基質(zhì)與常規(guī)反相色譜基質(zhì)的選擇性不同。Buszewki等比較了烷基胺和烷基鍵合相基質(zhì)用于反相分離，發(fā)現(xiàn)前者對(duì)分離極性化合物效果顯著，但其熱穩(wěn)定性不如后者。Wongyai用苯丙醇胺鍵合到硅膠上產(chǎn)生離子交換——反相基質(zhì)的混合模型，并且評(píng)價(jià)了酸性系列、中性和堿性物質(zhì)的分離效果。Friebe將Calixarene鍵合到硅膠上研究其作為選擇相能夠形成類似于環(huán)糊精的內(nèi)包合物。Chriswanto和伙伴們將聚吡咯相涂在硅膠上作為HPLC的特征化填料。Ge等合成了聚3－辛環(huán)吡咯改性硅膠，評(píng)價(jià)其作為蛋白質(zhì)的分離及探討酸、堿介質(zhì)的穩(wěn)定性。Skapo和Simpson則在流動(dòng)床中制得反相基質(zhì)，他們總結(jié)出在有機(jī)溶劑中通過這種途徑與常規(guī)鍵合相比較可制得重現(xiàn)性更好的基質(zhì)。Theinpont論述了在HPLC柱中已經(jīng)填裝好的硅膠的衍生化過程和通過這種途徑制得的色譜柱和常規(guī)鍵合相色譜柱進(jìn)行了比較。
　　
　　1.3親和色譜日本和歐洲較多研究多孔聚合物在液相色譜中的應(yīng)用，這些聚合物可用于分離各種芳香族化合物和糖類，高分子填料對(duì)保留值有較大影響，依據(jù)不同溶劑洗脫次序，可估算出聚合物溶解度參數(shù)。它們適用于親水溶質(zhì)排阻色譜，如有一種吸附劑TSK-SW硅膠帶有親水鍵合相，在較大的流速下能經(jīng)受高壓且有非常高的分離度，尤其適用于蛋白質(zhì)和腐殖酸的分離。曾有人描述過帶羥基、氰基、銨離子及芳基金屬醚鍵合到硅膠上，銨離子鍵合相主要以氫鍵結(jié)合，通過溶劑作用穩(wěn)定保留值。
　　
　　1.4離子交換色譜離子交換固定相的確研究過不少，如八十年代初流行的TSK型SW硅膠及基于二乙胺乙基(DEAE)制成的陰離子交換材料用于蛋白質(zhì)及核酸的優(yōu)化分離，低聚糖的分離采用Micro-PakAX-5。XAD樹脂是色譜中使用基本的固定相，弱酸、弱堿及兩性電解質(zhì)的分離均有人研究過，反離子以擴(kuò)散雙電層形式存在。也有人制備多孔甲基丙烯酸鹽離子交換劑，但多數(shù)人愿意使用商品化的交換劑。Sevec和Frechet[5]制得聚甲基丙烯酸縮水甘油酯共聚二甲基乙烯丙烯酸酯色譜柱(300×8mm)用于蛋白質(zhì)離子交換的制備色譜。他們能做到一次進(jìn)樣到這種色譜柱分離300mg的蛋白質(zhì)混合物。Gawdzrk和Matynia制備了一種交聯(lián)的(p,p’—二羥基苯)—丙烷二環(huán)氧甘油醚和二乙烯苯的甲基丙烯酸酯的多孔共聚物作為一種新的HPLC填料并且評(píng)價(jià)了其作為正相和反相分離的效果。Danielson和其合作者[6]用一種丙胺基硅基質(zhì)同Kel-F800反應(yīng)制得一種弱陰離子交換填料。
　　
　　1.5空間排阻色譜Kato等曾通過丁醚或三乙醇苯醚與TSKG3000SW空間排阻色譜法(SEC)結(jié)合合成HIC固定相材料，當(dāng)使用鹽溶液梯度洗脫時(shí)，可達(dá)到很高的分離度。一些極性鍵合相通過分配比調(diào)節(jié)的排阻色譜分離蛋白質(zhì)和多肽。Miller等報(bào)道過用醚相結(jié)構(gòu)合成大孔硅膠填料：Si-(CH2)3-O-(CH2CH2O)n-R;n=1,2或3;R=Me,Et或n-Bu。用這種填料制得的色譜柱可至少連續(xù)使用五個(gè)月其保留值不變。
　　
　　烷基鏈長(zhǎng)度和配體密度能直接影響到保留值與分離度，而使用低配位數(shù)密度基質(zhì)更易再生，不易變性，對(duì)分離大多數(shù)蛋白質(zhì)來說，基質(zhì)微球直徑在300?時(shí)具有強(qiáng)的再生力，直徑小到1mm的多孔微粒填入1cm的色譜柱中對(duì)于蛋白質(zhì)的分離十分有用。另一改進(jìn)色譜有效途徑是使用非多孔微球(1-3mm)，柱長(zhǎng)約30mm，柱效穩(wěn)定，當(dāng)小心控制流動(dòng)相溫度和所有儀器組成時(shí)，柱外效應(yīng)很小，曾有人通過洗脫法在2分鐘內(nèi)分離6種蛋白質(zhì)的混合物。
　　
　　Smigol[7]論述了均相聚合甲基丙烯酸縮水甘油酯共聚乙烯二甲基丙烯酸酯微球用特殊化功能的多孔介質(zhì)制得二醇或二乙胺相有較大孔隙和十八烷基官能團(tuán)有較少孔隙，這樣制得的一種基質(zhì)當(dāng)所有分子接近極性相時(shí)，較少的分子進(jìn)入多孔介質(zhì)，而限制了大分子進(jìn)入到十八烷基鍵合相中。
　　
　　總之，不論是何種類型的固定相對(duì)于手性異構(gòu)體的拆分以及蛋白質(zhì)和多肽大分子的分離仍在不斷的探索完善之中，從發(fā)展的趨勢(shì)看，尋求各種高分子材料作為新型色譜固定相前景光明。
　　
　　2液相色譜流動(dòng)相
　　
　　液相色譜應(yīng)用廣泛的是反相色譜，其流動(dòng)相的優(yōu)化組合直接關(guān)系到分離效果。八十年代二元流動(dòng)相組成優(yōu)化依賴于容量因子(k’)的對(duì)數(shù)值與極性溶劑的摩爾分?jǐn)?shù)關(guān)系，根據(jù)兩者線性關(guān)系，可以估算溶質(zhì)的保留值。曾有人確定過14種二元溶劑系統(tǒng)的容量因子與流動(dòng)相的關(guān)系。
　　
　　Scott,Snyder和Soczeuinski的色譜模型被應(yīng)用于分離烷基酚和萘酚，使用mBondapakNH2固定相，Nurok和Richard建立了一個(gè)簡(jiǎn)單的方程來確定溶劑組成的優(yōu)化，這種方法既可以用于TLC也可以用于HPLC。六種等離子強(qiáng)度溶劑的結(jié)合被應(yīng)用于產(chǎn)生六種三元流動(dòng)相，用于分離大范圍的化合物，這些混合物的極性通過增加極性溶劑來調(diào)節(jié)。Zima和Smolkova報(bào)道過在碳吸附劑上氨基酸保留值的酸堿效應(yīng)及離子強(qiáng)度，并且給出一系列方程式預(yù)言這些兩性電解質(zhì)的保留行為。Markl曾將有機(jī)磷和硫加入到流動(dòng)相中可以調(diào)整硅膠表面，這些化合物吸附在硅膠表面由于氫鍵作用而改變了選擇性和溶質(zhì)的保留值。Hitachi化學(xué)公司用于二甲基乙烯酰胺和二甲基聚丙烯酰胺流動(dòng)相用無機(jī)酸調(diào)節(jié)PH2-6來分析PI2550使用二乙烯苯—苯乙烯作填料，曾獲得專利。Cole和Dorsey研究過在反相分離梯度洗脫過程中二次平衡保留時(shí)間問題，他們發(fā)現(xiàn)當(dāng)加入3％1-丙醇到強(qiáng)溶劑和弱溶劑中去時(shí)，二次平衡時(shí)間大大縮短。在反相分離過程中，曾有人作過三種研究關(guān)于分配過程中熱力學(xué)驅(qū)動(dòng)力。Sentell和Henderson研究過C18相作為溫度和鍵合密度形狀選擇性并且發(fā)現(xiàn)低于室溫和高鍵合密度固定相可獲得較好的選擇性，他們建立了范德荷夫座標(biāo)圖并且指出作為一種功能鍵合密度圖形的差異。
　　
　　Gheong和Carr曾使用對(duì)于烷基苯在水和4種普通的有機(jī)混合溶劑的一系列無限稀溶液的活度系數(shù)的混合物中，觀測(cè)其保留過程。他們注意到非極性溶質(zhì)在飽和的十六烷甲醇溶液中和在純十六烷溶液中測(cè)得的活度系數(shù)稍微不同，表面積對(duì)鍵合的體積比率在鍵合相色譜中至關(guān)重要。
　　
　　Park等曾利用Kamlet-Tafl溶劑化色譜圖途徑來研究保留過程，他們測(cè)得氫鍵給體對(duì)甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈和四氫呋喃的水溶液的混合物的酸度進(jìn)而研究單取代酚基于溶劑能量線性關(guān)系的保留值。聚合芳香烴的使用作為一種探測(cè)保留過程，尤其是對(duì)于相關(guān)的選擇性引起人們濃厚興趣。這些研究很成功，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)協(xié)會(huì)已公布過這種標(biāo)準(zhǔn)參考材料作為評(píng)價(jià)反相柱的選擇性，其中有兩種觀點(diǎn)，Sander和Wise[8]發(fā)表過杰出的論文論述選擇性及其評(píng)價(jià)這種性質(zhì)途徑。Hoffman和Chang報(bào)道過一些溶質(zhì)溶解在弱極性溶劑中再注射到強(qiáng)極性流動(dòng)相時(shí)峰高和塔板數(shù)的增加，vukamanic等注意到進(jìn)樣溶劑的選擇能影響峰的完整性，包括產(chǎn)生裂峰和激變峰。已有各種各樣的途徑研究保留值和選擇性。有人曾連續(xù)使用同系物摸索選擇性，其它選擇性特征化的方法包括主要成分的分析和利用置換機(jī)理對(duì)于溶劑的模型吸附到鍵合相中熱力學(xué)處理。Kowalska也利用甲醇—水流動(dòng)相調(diào)整溶質(zhì)保留值，Kaibara等人則研究過反相固定相同溶質(zhì)的反應(yīng)，也有人[9]嘗試過利用UNIFAC法評(píng)價(jià)保留值，p－p鍵反應(yīng)的作用，用不同的三元溶劑系統(tǒng)計(jì)算等強(qiáng)度的流動(dòng)相，用溶質(zhì)和流動(dòng)相分配系數(shù)描述溶質(zhì)保留值，用體積特性參數(shù)如粘度、介電常數(shù)等關(guān)系反相保留值，還有用信息理論和“負(fù)熵”描述保留行為。Skelly等開發(fā)計(jì)算機(jī)輔助選擇內(nèi)標(biāo)物，可從90種內(nèi)標(biāo)物的數(shù)據(jù)庫(kù)中依據(jù)保留時(shí)間的排列次序擇其所用。
　　
　　溶劑化顯色現(xiàn)象尤其利用Kamlet-Talf公式近年來成為探索色譜保留值時(shí)髦的工具。這可從近連續(xù)的報(bào)道中可以看出。不管研究流動(dòng)相還是固定相其氫鍵效應(yīng)仍然非常重要。Carr研究小組[10]仔細(xì)地測(cè)量了甲醇、乙腈、2—丙醇和四氫呋喃(THF)水溶液混合物的氫鍵給體酸度并討論了相關(guān)的反相色譜保留值。Cheong和Choi[11]認(rèn)為可以利用線性溶劑化能量關(guān)系預(yù)言保留值，為了獲得合理的關(guān)聯(lián)系數(shù)在保留值和溶質(zhì)極性參數(shù)之間應(yīng)排除強(qiáng)氫鍵力的溶質(zhì)，他們假定可以利用在固定相上殘余氫氧根離子同這些化合物特殊的相互關(guān)系做到這點(diǎn)。Carr小組[12]另外也論述非常有價(jià)值的有關(guān)ET(30)溶劑強(qiáng)度的限度，他們指出如果在整個(gè)溶劑范圍內(nèi)即從100％水到100％有機(jī)改良劑存在非線性化性，同時(shí)也應(yīng)該再次強(qiáng)調(diào)，這也適合于別的單一參數(shù)溶劑，包括體積百分?jǐn)?shù)對(duì)k’作圖和溶劑強(qiáng)度參數(shù)S。三元流動(dòng)相組成溶劑的選擇性及特性也是人們感興趣的研究?jī)?nèi)容。Levin等[13]提出一種在二元流動(dòng)相相關(guān)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上預(yù)言三元流動(dòng)相的保留行為。Dzido和Eegel-hardt研究了單取代極性官能團(tuán)芳香族烴類化合物選擇性的變化，并且解釋了分子形狀大小、溶質(zhì)和改良劑間的相互關(guān)系以及溶劑化絡(luò)合物在固定相中先后次序的變化。Heron和Tchapla[14]研究了非水介質(zhì)反相LC的溶劑選擇，發(fā)現(xiàn)Kaelble三角圖比眾所周知的Snyder三角圖更為有效。
　　
　　各種各樣的研究有助于我們更好地理解流動(dòng)相在保留過程中的作用。Chen和Pietrzyk表面選擇性、有效性、線性烷基苯磺酸的分離度能通過流動(dòng)相離子強(qiáng)度和電解質(zhì)陽離子的選擇得到提高。Busewski等[15]研究了流動(dòng)相組成關(guān)于烷基胺相的保留值和選擇性的影響，Seibert和Poole應(yīng)用一種溶劑化參數(shù)模型使丙腈硅烷固定相同甲醇、乙腈、2—丙醇和四氫呋喃流動(dòng)相的保留性質(zhì)特征化。流動(dòng)相添加劑的研究也引起人們關(guān)注。McCrossen和Smpson研究戊腈和己腈作為流動(dòng)相添加劑，發(fā)現(xiàn)加入少數(shù)的這類物質(zhì)可引起保留值的明顯變化還能明顯改善有機(jī)胺的峰型。McCalley[16]研究有機(jī)溶劑強(qiáng)度對(duì)一些基本化合物的峰型影響，發(fā)現(xiàn)THF和甲醇比乙腈作流動(dòng)相有更好的色譜峰，盡管不同溶質(zhì)的行為有相當(dāng)大的變化。
　　
　　Olesik研究小組的興趣也繼續(xù)集中在流動(dòng)相的“增強(qiáng)流動(dòng)性”上。當(dāng)少量的二氧化碳加到傳統(tǒng)的反相色譜流動(dòng)相時(shí)，其粘度減少，擴(kuò)散系數(shù)增大，柱效提高。Lee和Olesik研究了結(jié)合升高溫度可進(jìn)一步增大擴(kuò)散系數(shù)和柱效，Cui和Olesik[17]報(bào)道過應(yīng)用基礎(chǔ)化學(xué)對(duì)這些方法的改進(jìn)，指出除了降低粘度外，二氧化碳也能破壞甲醇—水混合物的氫鍵。
　　
　　3液相色譜的檢測(cè)器
　　
　　液相色譜中檢測(cè)器是脆弱的部分。八十年代初便有各種各樣的檢測(cè)器問世，但一般集中在高等院校和儀器公司里。有關(guān)檢測(cè)器應(yīng)用的論文成千上萬。流行的是可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，而固定波長(zhǎng)檢測(cè)器由于適合用于大范圍的各種芳香化合物得到廣泛應(yīng)用。折光指數(shù)檢測(cè)器，主要是應(yīng)用空間排阻色譜在高分子工業(yè)以及食品和飲料工業(yè)中糖的檢測(cè)，由于工業(yè)界很少發(fā)表所測(cè)得的結(jié)果，其論文數(shù)相對(duì)較少。發(fā)展迅速的是開變波長(zhǎng)光電檢測(cè)器和電化學(xué)檢測(cè)器。依賴使用的檢測(cè)器合理檢測(cè)峰型或試樣純度，用柱前和柱后衍生化技術(shù)和別的新技術(shù)(如化學(xué)放大或激光源使用)獲得更多的信息。
　　
　　除了早期LC書籍中所涉及的檢測(cè)器外，還有許多現(xiàn)在HPLC檢測(cè)器方面的綜述[18]。隨著后來發(fā)展，毛細(xì)管液相色譜和毛細(xì)管電泳中使用敏感的吸收系數(shù)檢測(cè)器，其一途徑是論述了光照射晶軸得到明顯的改進(jìn)，另一途徑論述了從吸附電解質(zhì)到熒光物質(zhì)增加到流動(dòng)相中能量轉(zhuǎn)換，用連續(xù)的次級(jí)發(fā)射改進(jìn)檢測(cè)限。Berthod論述了LC中激光檢測(cè)器的使用，他討論LC檢測(cè)器性能需要，相關(guān)激光性能，以及幾個(gè)激光—LC相結(jié)合的例子，包括光掃描、熒光、光電離子化、熱光離子化、折光率、光度和聲光檢測(cè)器。Dasgupta[19]引用170篇參考文獻(xiàn)論述柱后操作技術(shù)在離子色譜(IC)中改進(jìn)選擇性和敏感度，Rochlin[20]引用36篇文獻(xiàn)比較不同類型的檢測(cè)器。
　　
　　液相色譜新的檢測(cè)技術(shù)不斷發(fā)展，以適應(yīng)毛細(xì)管和微球柱大小的需要，F(xiàn)ielden論述了近幾年正在迅速發(fā)展的液相色譜檢測(cè)技術(shù)，并將其分成二大領(lǐng)域，即光譜和電化學(xué)檢測(cè)器，他也考慮到擴(kuò)大柱后流動(dòng)試劑檢測(cè)領(lǐng)域。據(jù)此，F(xiàn)reeman等論述了在液相色譜中生物化學(xué)柱后反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)，酶、蛋白質(zhì)和抗體的使用從改進(jìn)檢測(cè)器選擇性和敏感度角度討論。Martin等人論述了當(dāng)今控制環(huán)境污染分析和監(jiān)測(cè)方面面臨的挑戰(zhàn)，他們檢驗(yàn)了多種分析技術(shù)，包括一些液相色譜儀，可以保證應(yīng)用于控制環(huán)境污染問題，在相關(guān)的一篇綜述中，Chau評(píng)價(jià)了可以提供分析金屬離子的色譜技術(shù)，液相色譜技術(shù)同特殊元素檢測(cè)相結(jié)合，可以分離金屬絡(luò)合物結(jié)構(gòu)，對(duì)于大氣、水、殘?jiān)汪~樣的金屬離子分析具有重要意義。
　　
　　在近年來興起的DNA分析領(lǐng)域中，已有不少人報(bào)道評(píng)價(jià)聚合酶鏈反應(yīng)產(chǎn)品的液相色譜分離和檢測(cè)中定量分析準(zhǔn)確度和精密度。Gaus描述了由PCR允許的DNA放大技術(shù)準(zhǔn)確定量，不需要放射性標(biāo)記。在一項(xiàng)值得慶賀的研究中，Schmitt等論述了如何合同放大二極基因組的樣品作為內(nèi)標(biāo)物，在PCR基礎(chǔ)上，在各種細(xì)胞和組織中主要基因組樣品和成纖維細(xì)胞增長(zhǎng)因子b的液相色譜分析。
　　
　　各種各樣檢測(cè)器的研究論文層出不窮，如紫外—可見光度檢測(cè)器，拉曼光譜檢測(cè)器，熒光檢測(cè)器，化學(xué)熒光檢測(cè)器，質(zhì)譜檢測(cè)器，電化學(xué)檢測(cè)器，核磁共振檢測(cè)器以及光電二極管陣列檢測(cè)器等等?？傊?，檢測(cè)器的研究其共同的方向均朝著靈敏度高、重新性好、相應(yīng)快、線性范圍寬、適應(yīng)范圍廣、對(duì)流動(dòng)相流量和溫度波動(dòng)不敏感、死體積小等特性。

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