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氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)合應(yīng)用于脂肪分析

2011-07-30

                                        氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)合應(yīng)用于脂肪分析

編輯：123儀器商城

　　羊脂油作為常用炮制輔料，尚未制訂其藥用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，僅在食品標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)其外觀形狀等制訂了一些理化指標(biāo)限度要求。為了規(guī)范羊脂油的使用，本研究首次采用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)對(duì)其脂肪酸類(lèi)成分進(jìn)行分析，以期對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)［2］。

　　羊脂油來(lái)源于牛科動(dòng)物山羊CaprahircusLinnaeus或綿羊OvisariesLinnaeus的脂肪油，甘、溫，具有補(bǔ)虛、潤(rùn)燥、祛風(fēng)、解毒的功效，主要治療虛勞羸瘦、久痢、口干便秘、肌膚皸裂等癥［1］。用本品炮制藥材能夠達(dá)到“增效”的目的，如羊脂油炙淫羊藿，可以增強(qiáng)淫羊藿的溫腎助陽(yáng)作用［2］。
　　　　　　
　　TraceGC-MS氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀，F(xiàn)ID檢測(cè)器。
　　
　　色譜條件：HP-5(0.25μm×30m,0.25mm)毛細(xì)管柱；程序升溫，初始溫度100℃，保持5min，以8℃/min升至180℃，再以28℃/min升至230℃；進(jìn)樣口溫度250℃；載氣N2；檢測(cè)器溫度250℃；分流比為20∶1；進(jìn)樣量0.1μl。
　　
　　質(zhì)譜條件：離子源為EI；電子能量70eV；離子源溫度200℃；接口溫度250℃；溶劑切割4min；掃描質(zhì)量范圍m/z35～688；掃描周期0.6s/dec，用NIST標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫(kù)檢索。
　　
　　羊脂油購(gòu)自北京清真食品公司，經(jīng)本文作者鑒定為牛科動(dòng)物綿羊Ovisarieslinnaeus的脂肪油。
　　　　
　　樣品制備取羊脂油樣品200g切成小塊，于120℃煉制，待出油量不再增加，去渣取油，備用。
　　
　　供試品溶液制備取0.4g羊油樣品，置于50ml錐形瓶，加入15ml0.5mol/L的KOH-MeOH溶液，于60℃水浴20～30min，至黃色油珠完全消失為止，冷卻后，再加10ml14%的三氟化硼乙醚溶液，水浴5min，取出冷卻后，加入10ml正己烷和10ml氯化鈉飽和溶液，振搖，取上層溶液備用。
　　
　　樣品測(cè)定對(duì)羊脂油樣品的總離子流色譜圖通過(guò)NIST標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫(kù)進(jìn)行檢索，并結(jié)合相關(guān)資料進(jìn)行人工解析，確認(rèn)了18種成分，歸一化法計(jì)算出各峰面積的相對(duì)百分含量。見(jiàn)表1。表1羊脂油的脂肪酸類(lèi)成分組成
　　　　
　　羊脂油所含長(zhǎng)鏈脂肪酸甘油酯［1］具有很高的沸點(diǎn)，如果直接進(jìn)行分析，高溫下脂肪酸甘油酯易分解；并且在色譜柱上如果要使各組分能夠按脂肪酸的不飽和度分離，應(yīng)使用極性固定相，而該類(lèi)固定相的耐溫性較差，從而限制了這種方法的應(yīng)用。因此一般都要進(jìn)行前處理，即脂肪酸衍生化，將脂肪酸甲酯化或乙酯化，一般選擇甲酯化的方法，并以三氟化硼－甲醇法常用［3］。
　　
　　本實(shí)驗(yàn)以120℃煉制的羊脂油為樣品，采用三氟化硼－甲醇法對(duì)樣品進(jìn)行甲酯化處理，其產(chǎn)物經(jīng)GC-MS分析，取得滿(mǎn)意的分離效果，經(jīng)NIST譜圖庫(kù)檢索，從中檢出16種脂肪酸成分，占總氣相色譜峰面積的94.61%。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照，分析，確定每一個(gè)成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)，按峰面積百分比法進(jìn)行定量分析，分別求得各組成化合物的相對(duì)含量見(jiàn)表1，結(jié)果顯示羊脂油所含不飽和脂肪酸有9種，包括油酸(34.45％)、反式9-十八碳烯酸(10.16％)、Z-11-十八碳烯酸甲酯(3.30％)、棕櫚油酸(2.03％)、7,10-十八碳二烯酸酸(1.69％)、亞油酸(1.37％)、2-己基環(huán)丙烷酸(1.09％)、10-十九烯酸(0.24％)、Z-11-十四碳烯酸甲酯(0.15％)；飽和脂肪酸有7種，包括棕櫚酸(21.59％)、硬脂酸(13.49%)、肉豆蔻酸(2.15%)、十七烷酸(1.34％)、十五烷酸(0.60%)、14-甲基棕櫚酸(0.60％)、15-甲基棕櫚酸(0.36％)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道［1］相符，并進(jìn)一步增加了成分的組成。
　　
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，羊脂油中油酸和棕櫚酸的含量更高，二者的含量已經(jīng)超過(guò)總脂肪酸量的50％，均具有降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗血小板聚集以及抗血栓形成等作用，此外亞油酸是人體必需的脂肪酸，具有防止血栓形成、軟化血管、調(diào)節(jié)脂肪代謝，降低血中膽固醇的作用。
　　
　　本實(shí)驗(yàn)對(duì)羊脂油的成分進(jìn)行了初步研究，為該炮制輔料其真?zhèn)蝺?yōu)劣的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了切實(shí)可行的分析方法，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。各地羊脂油的氣相色譜分析結(jié)果將另文發(fā)表，其對(duì)所炮制飲片藥理作用的影響正在進(jìn)一步研究中。

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